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产品中心 >重组蛋白 >蛋白定量分析 >Bradford 蛋白浓度测定试剂盒
Bradford 蛋白浓度测定试剂盒
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货号

产品名称

规格

价格

优惠价

GM-040701-1

 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒

500T

119

95

GM-040701-2

 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒

2500T

499

399

产品说明:

Bradford蛋白浓度测定法是目前常用的灵敏度较高的蛋白浓度测定方法之一,它是根据考马斯亮蓝G-250染料(Bradford染色液)与蛋白结合,使染料的最大吸收峰从A456变为A595,且测定的吸光值与蛋白浓度成正比关系的原理设计的。通过吸光值,推算蛋白浓度,实现了蛋白浓度测定的快速性和简便性。

产品特点:

● 灵敏度高,比Lowry法大约高四倍,最低蛋白检测量可达1μg

● 测定速度快、简单,仅需一种试剂即可。

Bradford蛋白测定法不受大多数样品中化学试剂的影响。

 

产品包装:

产品编号

GM-040701-1

GM-040701-2

规格

500次微量测定

2500次微量测定

Bradford染色液

100 ml2*50ml

500ml

蛋白标准品(BSA

1ml(5mg/ml)

1ml*5(5mg/ml)

说明书

-

-

保存条件:

染色液4℃保存,蛋白标准品-20℃保存,有效期一年。

操作步骤:

1)  将浓度为5mg/ml的蛋白标准品母液取10μl稀释至100μl,使终浓度为0.5mg/ml的溶液。

注:标准品稀释液为蛋白样品的溶解液,原则上蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但也可用0.9%NaclPBS进行稀释。

2)  将不同浓度的蛋白标准品按1,2,4,8,12,16,20μl等加入到96孔板中,不足20μl的加标准品稀释液补足。同时,设立空白对照孔。(如下表)

孔号

A

B

C

D

E

F

G

H

蛋白标准品(μl)

0

1

2

4

8

12

16

20

标准品稀释液(μl)

20

19

18

16

12

8

4

0

Bradford染色液(μl)

200

200

200

200

200

200

200

200

对应蛋白含量(μg)

0

0.5

1

2

4

6

8

10

总体积(μl)

220μl 

3)  将适量的样品加入96孔板,不足20μl的用标准品稀释液补足,然后在所有的样本孔中加入200μl Bradford染色液混匀,室温放置5-10min

4)  在酶标仪上的560610nm波长范围处检测吸光度,其中595nm波长为最佳。

5)  根据测得的蛋白标准品的吸光度,绘制标准曲线。

6)  根据测得的样品的吸光值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。

注意事项:

1.       Bradford染色液使用前,应充分混匀。同时,酶标仪需预热20分钟。

2.       但受到略高浓度的去垢剂影响时,蛋白与染料的结合可能会受到不同程度的影响。如:SDS需低于0.01%Triton X-100低于0.05%Tween 20,60,80低于0.015%等。

3.       要得到更为精确的蛋白浓度结果,每个蛋白梯度和样品均需做复孔,每次均应做标准曲线。

4.       Bradford染色液恢复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。 

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