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产品中心 >重组蛋白 >蛋白定量分析 >BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)
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货号

名称

规格

价格

优惠价

GM-040301-1

BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)

500T

359元

288元

GM-040301-2

BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)

2500T

1029元

819元

GM-040301-3

BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)

5000T

1899元

1515元

产品说明

BCA(Bicinchoninic acid)法是目前应用比较广泛的蛋白质浓度测定方法。其原理与Lowery方法类似,通过在碱性环境下蛋白质与CU2+产生双缩脲反应形成紫蓝色复合物,在562nm处有高的吸光值并与蛋白质浓度成正比。BCA蛋白浓度测定法实现了蛋白质浓度测定的简便、灵敏、快速和稳定性。 

产品特点

●灵敏度高,最小检测蛋白量可达0.2μg。

●速度快,比一般的BCA蛋白浓度测定试剂盒显色所用时间短。

●线性范围广,20~2000μg/ml浓度范围内有较好的线性范围。

●不受大部分样品中的化学物质的影响,可以兼容样品中5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80等。

产品包装

产品编号

GM-040301-1

GM-040301-2

GM-040301-3

规格

500次微量测定

2500次微量测定

5000次微量测定

BCA试剂A

2×50ml

500ml

2×500ml

BCA试剂B

3ml

15ml

25ml

蛋白标准品(BSA

20mg/

100mg/

2×100mg/

蛋白标准品配制液

1.5ml

5ml

2×5ml

说明书

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保存条件

室温保存,蛋白标准品(BSA)-20℃保存,有效期12个月。

操作步骤

1.       BSA标准液的制备

(1) 向30mg BSA标准品中加入1.2ml蛋白标准品配制液,充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准母液。配制后可立即稀释使用,也可以-20℃长期保存。

(2) 取适量25mg/ml蛋白标准母液,稀释至终浓度为0.5mg/ml。

注:标准品稀释液为蛋白样品的溶解液,原则上蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但也可用0.9%NaclPBS进行稀释。 

2.       根据样品数量配置适量的BCA工作液,50体积的BCA试剂A中加入1体积的BCA试剂B(50:1) ,充分混匀。(BCA试剂B加入BCA试剂A中后,迅速浑浊,通过混匀后立即变澄清)

3.       将不同浓度的蛋白标准品(如124681216μl等)和待测样品分别加入到96孔板,不足25μl的加标准品稀释液补足。同时,设立空白对照孔。

4.       向各孔加入200μl的工作液,振荡30s充分混匀,37℃放置30min。(或60℃放置15min,也可室温放置216h,如待测样品浓度较低可适当增加孵育温度或时间)

注:样品与工作液比例为1:8,若样品有限,也可为1:20

5.       冷却到室温,在酶标仪上的540595nm波长范围处检测吸光度,其中562nm波长为最佳。根据蛋白标准品的吸光度,绘制标准曲线。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度。 

注意事项

1.       使用BCA蛋白测定法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,因此需注意保持定时和定温,以确保精确定量。

2.       低温或长期保存时,如发现细菌污染,则应丢弃,避免对实验结果造成影响。

3.       实验操作规范,提高上样量的精确度。

4.       每次测定都需做相应的标准曲线,因为显色反应与温度和时间的变化有关,精准的蛋白定量宜每次都做标准曲线。

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