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产品中心> 慢病毒> 细胞自噬-LC3质粒/慢病毒 Autophagy-Plasmid/Lentivirus
细胞自噬-LC3质粒/慢病毒 Autophagy-Plasmid/Lentivirus

自噬是一种通过溶酶体在细胞内部降解功能失调的细胞组分的过程。自噬可以降解和消化受损、变性细胞器蛋白质与核酸等生物大分子。为细胞的再生和修复提供原料,实现细胞内物质的循环利用。自噬属动态过程。在基础条件下,各类细胞中均存在低水平自噬。但营养不足或缺氧等刺激可能导致自噬水平上调。

自噬是广泛存在于真核细胞的现象,并且可分为巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬三大类。这是一个受到紧密调控的步骤,此步骤是细胞生长、发育与稳态中的常规步骤,帮助细胞产物在合成、降解以及接下来的循环中保持一个平衡状态。目前已有多份研究表明自噬在许多细胞的分化进程中被不同程度地激活,例如参与血管生成、成骨分化、脂肪生成、神经发生等过程。


细胞自噬常用的检测方法:

1. LC3 turnover实验,单检测LC3-II的静态水平并不能够完全反映细胞内的自噬潮变化,需要联合自噬后期抑制剂如溶酶体抑制剂Bafilomycin A1或CQ,来比较LC3-II在抑制剂加入前后的变化差异。

2. 绿色萤光蛋白(GFP)的抗降解性,通过检测转染了GFP-LC3的细胞所产生的GFP片段来评判细胞内自噬水平的变化。

3. p62蛋白作为自噬活性指标,经常被科研人员用作自噬水平升高的辅助检测手段,然而需联合其他检测手段进行证实。

4. mRFP-GFP-LC3双萤光活细胞成像,实时动态监测自噬过程,并且能够通过颜色变化确定自噬潮水平的高低。

5. 使用电子显微镜,然而对实验设备和实验者的技能与辨别能力要求较高,有学者推荐进行双盲实验来定量细胞中自噬体或自噬溶酶体数量。

6. 流式细胞术,可以检测各个细胞时相的自噬水平,还可以直接计算出萤光强度和阳性细胞百分比,然而在细胞在染色之前,需要使用去垢剂预处理细胞质中的LC3-I。

细胞自噬-LC3质粒/慢病毒 Autophagy-Plasmid/Lentivirus产品(3)
过表达
类别 货号 名称 研究内容 载体类型 表达方式 真核抗性 荧光标记
慢病毒 GM-1314L201H pGMLV-GFP-hLC3慢病毒

Autophagy自噬

细胞示踪

慢病毒 组成型 Puromycin GFP
GM-1314L204H CMV-TurboRFP-EGFP-LC3-PGK-Puro

Autophagy自噬

慢病毒 组成型 Puromycin GFP
质粒 GM-1314P101H PCDNA3.1-EGFP-H_LC3B(pGM-CMV-GFP-hLC3)

Autophagy自噬

细胞示踪

普通 组成型 其他 GFP

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