众所周知，ADC药物由单克隆抗体（mAb），有效载物（Payload）和连接两者的连接物（Linker）组成。在ADC设计研发过程中，首要的是药物靶点的选择，另一个重要因素是内吞/内化的效率。
ADC药物通过靶向肿瘤细胞表面的抗原，并利用抗体介导的内吞/内化途径将细胞毒素传递到肿瘤细胞内部，从而实现对肿瘤细胞的杀伤作用。
抗体内化
结合常规的ADC药物内化途径，一般来说，内化又称为内吞，正常的内吞作用可分为三个阶段：芽的形成、膜的弯曲和囊泡的成熟和膜的断裂并释放到细胞质中。
ADC药物内化途径可按是否依赖于网格蛋白细分
| 网格蛋白介导的内吞作用 | / |
| 非网格蛋白介导的内吞作用 | 小窝介导的内吞作用 |
| 小窝蛋白非依赖性载体蛋白/GPI-富集的早期内区室（CLIC/GEEC） | |
| 巨胞饮作用 |
抗体能否被内化主要由靶点决定，而抗体内化的效率则与抗原密度、抗体亲和力以及抗体与抗原结合表位密切相关。因此，抗体内化效率对于ADC药物的早期筛选至关重要，需要精准表征。
ADC抗体内化效率体外检测工具—DT3C
DT3C(DT-3C)蛋白广泛用于检测mAb内化能力，尤其在ADC药物的内化效率检测中。DT3C 是重组表达的融合蛋白，由白喉毒素的Fragment A (仅毒素部分)和G 群链球菌的3C片段(lgG 结合部分)融合而成。该蛋白能够与抗体的Fc 端高度亲和，与抗体结合的DT3C分子在抗体被内吞时一同进入细胞，在胞内弗林蛋白酶(furin protease)的作用下，释放出具有毒性的DT，DT能够抑制EF2-ADP 核糖基化的活性，阻断蛋白翻译过程，最终导致细胞死亡，而未进入细胞的DT3C 则不具有杀伤细胞的活性。因此可根据细胞杀伤情况来评价抗体的内化效率。
用心做好细胞，为更好的靶向药
吉满生物重组DT3C 蛋白(Cat.GM-046001RP) 从大肠杆菌中(E.coli)表达，包含33-417aa(P00588) & 291-497aa (P19909)，8His标签序列置于DT3C编码序列的N端，纯度≥90%(SDS-PAGE)，分子量69.4 kDa，溶解在pH7.4的PBS中，经过0.2μm过滤膜除菌，内毒素< 1EU/μg。点击此处了解产品
| 制备简单 |
| 在室温下孵育30分钟即可形成mAb-DT3C偶联物 |
| 多物种适用 |
| 可与来自不同物种的任何IgG结合 |
| 检测便捷 |
| 通过流式细胞术或荧光显微镜等方法，即可快速、准确地检测mAb在细胞表面的内化效率 |
| 内化效率高 |
| 分子量小于Mab-ZAP，mAb-DT3C内化效率高于mAb-Mab-ZAP |
产品列表
| 名称 | 货号 | 规格 | 单位 |
| Recombinant DT3C Protein | GM-046001RP-1 | 100 μg | 管 |
| GM-046001RP-2 | 1 mg | 管 |
验证结果
图1 细胞内化实验（h12F3 mAb与 DT3C的摩尔比为1:6、细胞量3×103 Cells/孔）
图2 经SDS-PAGE验证，吉满DT3C蛋白纯度高于90%
相关产品
除此以外，吉满生物还可提供GMTiter试剂盒，配套DT3C蛋白产品，用于ADC药物的内化效率检测。
| 名称 | 货号 | 规格 |
| GMTiter TM Luminescent Cell Viability Assay | GM-040504D | 10000T |
| GM-040504C | 1000T | |
| GM-040504B | 100T*10 | |
| GM-040504A | 100T |
