原理简介
Cre-loxP系统是一种基因工程技术，利用 Cre 重组酶和 loxP 位点来对基因组进行精确的修饰。
Cre 重组酶由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码，是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能够识别并切割 loxP 位点。LoxP位点长为34bp，由两个13bp的反向回文序列和8bp的中间间隔序列共同组成，反向回文序列是Cre重组酶的识别和结合区域，间隔序列决定LoxP序列的方向。
Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程，大致分成三种情况：
1、两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相同，Cre重组酶敲除loxP间的序列
2、两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相反，Cre重组酶诱导loxP间的序列翻转
3、两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶诱导两条DNA链发生交换或染色体易位
图1 Cre-lox系统介导的DNA重组机制（来源网络）
Cre-Loxp AAV优势
Cre-Loxp AAV 利用AAV作为载体，将Cre重组酶递送至目标细胞内。Cre重组酶是一种DNA重组酶，能够催化DNA分子上的重组事件，特别是在LoxP序列的两个LoxP位点之间引发基因组的重组。通过将Cre重组酶与AAV结合，可以实现对目标细胞内基因的特异性编辑和调控，从而实现基因功能研究和疾病模型的建立。
一、更强的区域特异性
由于病毒可以通过局部注射的方式保证区域特异性感染，再加上驱动Cre基因的特异性启动子，能够实现更强的区域和细胞特异性的基因重组。
二、更少的花费
购买转基因动物的费用一般是比较昂贵的，而且转基因动物的饲养、基因型鉴定都需要不少的人力、物力，而病毒的制备、保存和注射所花的费用相对来说是比较少的。
三、更短的实验周期
由于病毒能非常迅速的起作用，而转基因小鼠的交配过程特别耗时间，因此采用注射病毒到转基因小鼠体内的方式，可以大量缩短实验周期。
Cre-Loxp AAV应用场景
场景一：构建动物模型
构建条件性敲除/过表达小鼠模型通常是通过两种转基因动物（一种带Cre，一种带loxP序列）进行至少2代杂交获得，耗时较长，成本较高。但使用腺相关病毒（AAV），通过Flox小鼠注射AAV-Cre或者Cre小鼠注射AAV-LoxP的方式，周期短，成本低，时空特异性表达，可以极大的提高转基因小鼠模型的应用效率。
图2 TGFBI flox/flox小鼠注射AAV-Cre
（AAV8-mCD68-Cre）应用案例
吉满生物提供的Cre AAV可以灵活、高效地结合Gene-floxed小鼠实现条件性敲除，免去Cre小鼠维系及与Gene-floxed小鼠杂交环节。
场景二：神经领域
在光遗传、化学遗传、钙成像领域，利用CRE、FLP等技术，实现基因的条件可控性表达，如有CRE的转基因动物时，可直接利用携带DREADD转基因的DIO载体。
图3 Cre依赖的化学遗传激活案例
通过将AAV-Cre注入到特定脑区或神经元群中，从而研究神经回路在行为和认知过程中的作用。
图4 rAAV2-retro 和 Cre系统
介导皮层纹状体神经环路示踪案例
吉满生物提供的Cre-Loxp AAV可以实现对特定神经回路的解剖和调控，从而探究其在不同行为、认知和疾病中的作用。这为神经回路水平的研究提供了重要工具和手段。
部分客户引文
| Yu G, Liu P, Huang X, et al. 20-HETE mediated TRPV1 activation drives allokinesis via MrgprA3+ neurons in chronic dermatitis[J]. Theranostics, 2024, 14(4): 1615. |
| Ji X, Zhao Z. Exposure to enriched environment ameliorated chronic unpredictable mild stress-induced depression-like symptoms in rats via regulating the miR-92a-3p/kruppel-like factor 2 (KLF2) pathway[J]. Brain Research Bulletin, 2023, 195: 14-24. |
| Wu Y, Sun Y, Song Y, et al. PPA1 promotes adipogenesis by regulating the stability of C/EBPs[J]. Cell Death & Differentiation, 2024: 1-13. |
| Shuai L, Li B H, Jiang H W, et al. DOT1L regulates thermogenic adipocyte differentiation and function via modulating H3K79 methylation[J]. Diabetes, 2021, 70(6): 1317-1333. |
吉满产品
吉满可以为客户提供基于Cre-LoxP系统的AAV病毒现货产品和定制服务，以及其他重组酶系统病毒定制服务，比如与Cre-LoxP系统无交叉影响的vCre-vLoxP、sCre-sLoxP系统，及Flp-FRT/F5系统和Dre-Rox1/Rox2系统等。点击了解产品
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