背景介绍
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒科下的一个属,其基因结构和其他逆转录病毒类似。包含RNA和蛋白,遗传信息储存在RNA中,衣壳糖蛋白与细胞膜上特异受体结合而进入易感靶细胞。其RNA进入靶细胞,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。点击了解产品
慢病毒载体基因递送和表达的特点
一、感染谱广
可有效感染肿瘤细胞、神经元、心肌细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型细胞
二、稳定表达
通过将外源基因整合到宿主细胞基因组上,可实现目的基因长期稳定表达,不随细胞分裂传代而丢失
三、安全性高
未发现致病性,已被用于CAR-T治疗作用于人体
四、免疫原性低
体内注射不会引起明显的免疫反应,适用于动物实验
五、包装容量有限
插入的外源基因序列需在4kb以下
六、包装滴度较低
相比腺病毒与腺相关病毒,慢病毒包装滴度稍低
慢病毒包装
示意图(图片来源于网络)
慢病毒包装流程
慢病毒包装/浓缩试剂盒
部分客户引文
Duan Y, Li Q, Wu J, et al. A detrimental role of endothelial S1PR2 in cardiac ischemia-reperfusion injury via modulating mitochondrial dysfunction, NLRP3 inflammasome activation, and pyroptosis[J]. Redox Biology, 2024: 103244. |
Lin P, Chen W, Long Z, et al. RBBP6 maintains glioblastoma stem cells through CPSF3-dependent alternative polyadenylation[J]. Cell Discovery, 2024, 10(1): 32. |
Shan L, Liao X, Yang X, et al. Naked cuticle homolog 2 controls the differentiation of osteoblasts and osteoclasts and ameliorates bone loss in ovariectomized mice[J]. Genes & Diseases, 2024: 101209. |
Liu L, Liu Z, Liu Q, et al. LncRNA INHEG promotes glioma stem cell maintenance and tumorigenicity through regulating rRNA 2’-O-methylation[J]. Nature Communications, 2023, 14(1): 7526. |
Zhang X, Guo H, Chen J, et al. Highly proliferative and hypodifferentiated CAR-T cells targeting B7–H3 enhance antitumor activity against ovarian and triple-negative breast cancers[J]. Cancer Letters, 2023, 572: 216355. |
Zhang C, Li Q, Xu Q, et al. Pulmonary interleukin 1 beta/serum amyloid A3 axis promotes lung metastasis of hepatocellular carcinoma by facilitating the pre-metastatic niche formation[J]. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2023, 42(1): 166. |
常见问题解答
Q | 慢病毒颗粒浓缩后没看到白色沉淀,怎么回事? |
A | 如果看不到明显的白色沉淀,就在沉淀可能形成的区域用移液器小心吹打;白色沉淀的多少并不代表病毒量的多少。白色沉淀中除病毒颗粒外,还有血清蛋白和少量的细胞碎片和 基因组 DNA 等。二者在使用效果上无明显差异,均溶于水,但荧光素钠盐溶解度(100mg/mL)要高于荧光素钾盐(60mg/mL)。在体内实验研究中,研究者更倾向于选择荧光素钾盐。 |
Q | 按照慢病毒包装试剂盒操作进行到收集病毒上清液这一步,该如何保存? |
A | 如果3天内进行浓缩,可以将慢病毒悬液存储在4°C。通常不建议超过3天,因为病毒的活性可能会逐渐降低;长期储存的话,建议将慢病毒悬液分装到无菌的冷冻管中,并存储在-80°C的超低温冰箱中。 |
Q | 病毒上清液与浓缩液混合后,孵育时间长短有影响吗? |
A | 4℃放置的时间越长(如放置过夜),病毒的得率可能会更高;一般 4℃条件下病毒颗粒可以在浓缩液里稳定保存几天。 |
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