背景介绍
RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基因的转录或翻译来抑制基因表达。
由于RNAi具有高度的序列专一性，可以特异地沉默基因，从而获得基因功能丧失或基因表达量的降低。
（图片来源：RNA Therapeutics Institute）
基因干扰有哪些应用呢？
一、基因功能研究
RNAi具有高效特异性抑制基因表达的特点，运用病毒载体介导shRNA干扰可以调控基因表达，进而研究基因功能
二、信号通路研究
可以运用该技术进行体内体外相关信号通路及作用机制的研究
三、构建疾病模型
通过病毒载体介导shRNA干扰可构建转基因抑制小鼠模型
四、基因治疗
RNAi被用于基因表达异常升高引起的疾病，如肿瘤和病毒感染等
五、药物开发
利用RNAi特异性高效地抑制基因的表达，获得基因功能抑制表型，进而大规模地筛选出基因靶点，从而实现短时间内药靶在细胞水平和动物水平的筛选和评定。
常用的基因干扰工具及区别
常见的干扰工具包括化学合成的双链小干扰RNA(siRNA)、基于载体的短发夹RNA(shRNA)。
siRNA | shRNA | |
稳定性 | 低、容易降解，寿命短 | 高 |
作用时效 | 作用时间较短，一般1周左右 | 作用时间较长，持续数星期甚至更长 |
脱靶率 | 高 | 低 |
导入细胞 的方式 | 普通转染，对于难转染的细胞转染效率低 | 导入方式多样（质粒载体/病毒载体） |
表达方式 | 直接化学合成 | 可由聚合酶Ⅱ型和Ⅲ型启动子驱动；可使用诱导表达系统；可与报告基因共表达，可视化细胞导入效率 |
抑制效果 检测时间 | 取决于靶蛋白的半衰期 | |
siRNA简介
siRNA(Small interfering RNA；short interfering RNA；silencing RNA) 是化学合成的小分子，导致基因沉默和序列特异性RNA降解的重要中间媒介，具有特殊的结构特征即5'端磷酸基团和3'端羟基，其两条链的3'端各有两个碱基的游离，通过与目标mRNA特异性互补结合降解mRNA。
（siRNA结构）
吉满生物可根据客户提供的目的基因信息，设计并合成siRNA,也可以根据实验需求，提供多种荧光标记和化学修饰的siRNA。
吉满生物siRNA合成服务
siRNA合成 | |
普通siRNA | 产品质量高度稳定，冻干粉形式提供 |
化学修饰siRNA | 5’氨基、2’甲氧、5’磷酸化、5’胆固醇、5’生物素 |
荧光标记siRNA | 5’-CY3（红光）、5’-FAM（绿光） |
siRNA阴性对照 | 阴性对照靶点与哺乳动物基因无同源性 |
siRNA阳性对照 | 人源GAPDH、鼠源 MAPK1 |
siRNA套餐 | |
针对每个靶基因(仅人、小鼠、大鼠编码基因)设计3条 siRNA(各5nmol），套餐产品还附赠阳性对照和阴性对照各 2.5nmol、转染荧光对照1nmol | 通常标准使用条件下即细胞转染效率90%以上，至少1条siRNA的mRNA水平沉默效率可达70% |
shRNA简介
小发卡RNA(a small hairpin RNA；short hairpin RNA, shRNA)是一段具有紧密发卡环的RNA序列，shRNA包括两个短反向重复序列，可以克隆至shRNA表达载体，后通过质粒转染或病毒转导引入细胞，在细胞中经酶切形成siRNA，用于沉默靶基因的表达。
（shRNA结构）
shRNA的特点
一、靶向性强
理论上，shRNA能够对目标基因进行特异性的抑制，而不影响其他基因的表达，在基础研究和临床治疗中有着广泛的应用前景。
二、适用范围广
shRNA可以用于多种类型的细胞和生物体系中，并且能够针对多种不同的基因进行沉默。因而使得shRNA成为了研究和治疗各种疾病的重要手段。
三、操作简单
与其他基因敲除技术相比，shRNA的设计、合成和操作相对简单。通常只需要将shRNA序列克隆到质粒或病毒载体中，然后导入到细胞内即可实现基因沉默效应。
四、抑制效果持久
shRNA可以在细胞内诱导长期的基因沉默效应，其抑制效果可以持续几天甚至数周。这种特点使得shRNA成为了研究和治疗需要长期监测的疾病的重要工具。
五、可视化的细胞转染效率
通过与荧光蛋白如GFP共表达，可以快速筛选质粒转染或病毒感染阳性的目的细胞，大大提高筛选效率。
常见的shRNA干扰载体除了质粒表达载体外，还有病毒载体，包括慢病毒载体(LV)、腺病毒载体(AD)、腺相关病毒载体(AAV)等。
吉满生物shRNA载体构建服务
吉满生物拥有丰富的载体构建经验，有普通载体和病毒载体可供选择。吉满生物可为科研人员提供编码基因以及非编码基因(circRNA,lncRNA和microRNA）的干扰服务。
一、服务优势
高效的载体构建策略、优惠的产品价格、测序验证100%正确
二、服务流程
