lenti-dCAS9-KRAB-Blast Lentivirus
lenti-dCAS9-KRAB-Blast Lentivirus 是一种用于构建 CRISPRi(CRISPR interference)基因转录抑制体系的慢病毒工具。该病毒携带编码dCas9-KRAB融合蛋白的表达元件,其中dCas9为失去核酸酶切割活性的Cas9蛋白,可在sgRNA引导下特异性结合目标基因启动子或转录起始位点附近;KRAB为转录抑制结构域,能够募集相关表观遗传抑制复合物,从而降低靶基因的转录水平,而不造成DNA双链断裂。该载体同时含有 Blasticidin(Blast)抗性筛选标记,便于在哺乳动物细胞中筛选稳定表达dCas9-KRAB的细胞群或单克隆细胞系。后续导入针对目标基因设计的sgRNA后,可实现可编程、特异性的基因沉默。