生物体细胞内最重要的能量来源是ATP,是衡量细胞新陈代谢水平的重要指标。在同种细胞,近似的培养条件下,ATP的含量与活细胞数目具有良好的线性关系。即可通过ATP含量反应活细胞的数目。萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)是一种分子量约为61kDa的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,其能够把荧光素(luciferin)催化成氧化荧光素(oxyluciferin),在氧化的过程中会发出波长为560nm左右的生物荧光。即该反应为ATP依赖的发光反应。其发光强度与ATP含量线性相关。
细胞活力检测试剂盒(GMTiterTM Luminescent Cell Viability Assay)的特点是操作非常简便,实验前无需对细胞进行清洗或收集,而且可以直接使用,对细胞的裂解和检测一步完成,省去了混合试剂的步骤,节省了实验时间。且在一定的实验时间内发光值相对稳定,检测结果准确可靠。
检测原理示意图