miRNA通过碱基互补配对的方式识别靶基因的3'UTR区，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。因此，可以将目的基因的3'UTR区域构建到含luciferase的报告基因质粒上，和miRNA mimics/inhibitors以及海肾内参质粒共转染，通过检测荧光值的变化，判断miRNA对靶基因的作用。再通过对3'UTR区进行定点突变的方法进一步确定miRNA与靶基因3'UTR的作用位点。miRNA对靶基因功能的调控是当前研究的热点。通过利用荧光素酶报告基因检测实验寻找或验证miRNA对靶基因的调控作用是当前最常用的技术。
常用载体：PGL3-CMV-LUC-MCS
双荧光素酶报告基因检测系统具有如下特点：
（1）灵敏度高、动态范围广、应用灵活；
（2）转录后无需翻译即具有生物活性；
（3）实验中报告基因和对照基因的酶没有种源同源性；
（4）萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶对应不同的反应底物，反应中不存在交叉干扰。
miRNA与靶基因相互作用研究主要包含：
（1）miRNA与靶基因结合验证：验证miRNA与靶基因（mRNA，lncRNA,circRNA）结合作用；
（2）ceRNA作用研究：验证不同把好基因对miRNA的竞争性结合作用。
miRNA与mRNA 3'UTR报告基因原理示意图
（1）吉满生物可根据客户需求提供实验方案，评估项目可行性，提供一站式服务；
（2）吉满生物具有丰富的分子克隆报告基因检测经验，可快速获得结果，周期较短。
miRNA通过碱基互补配对的方式识别靶基因的3'UTR区，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。因此，可以将目的基因的3'UTR区域构建到含luciferase的报告基因质粒上，和miRNA mimics/inhibitors以及海肾内参质粒共转染，通过检测荧光值的变化，判断miRNA对靶基因的作用。再通过对3'UTR区进行定点突变的方法进一步确定miRNA与靶基因3'UTR的作用位点。miRNA对靶基因功能的调控是当前研究的热点。通过利用荧光素酶报告基因检测实验寻找或验证miRNA对靶基因的调控作用是当前最常用的技术。
常用载体：PGL3-CMV-LUC-MCS
双荧光素酶报告基因检测系统具有如下特点：
（1）灵敏度高、动态范围广、应用灵活；
（2）转录后无需翻译即具有生物活性；
（3）实验中报告基因和对照基因的酶没有种源同源性；
（4）萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶对应不同的反应底物，反应中不存在交叉干扰。
miRNA与靶基因相互作用研究主要包含：
（1）miRNA与靶基因结合验证：验证miRNA与靶基因（mRNA，lncRNA,circRNA）结合作用；
（2）ceRNA作用研究：验证不同把好基因对miRNA的竞争性结合作用。
miRNA与mRNA 3'UTR报告基因原理示意图
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（2）吉满生物具有丰富的分子克隆报告基因检测经验，可快速获得结果，周期较短。
