创新发现,从这里开始
当前位置:新闻资讯 > 干货分享 > 技术分享
细胞永生化工具 | 永生化慢病毒的应用原理及方法
吉满生物
2024-10-09

什么是永生化?


永生化是一种细胞生物学术语。是指动物细胞脱分化失败,受到病毒感染,外源恶意代码转染,辐射或药剂作用后,细胞分裂次数限制机制和DNA检查-自毁机制失灵,导致细胞具有无限分裂生长的能力的过程成为细胞永生化。


(永生化原理图)


永生化细胞的价值


1.永生化细胞稳定均一、性状一致,是体外研究细胞增殖、分化、凋亡、衰老等的理想模型

2.可使传代困难、增殖慢、易衰老的细胞获得永生,并且永生化细胞比原代细胞更易于培养,因为它们生长更强劲,可以获得更多的细胞资源,也节省了分离细胞的周期,降低反复分离原代细胞的成本

3.永生化细胞和肿瘤细胞关系密切,是研究肿瘤发生机制的重要模型

4.永生化细胞可建立稳定细胞库,遗传上相同的种群,有助于提供一致且可重复的实验结果


不同细胞永生化的方法也不同


HPV 可介导人的包皮细胞、角化上皮以及乳腺、胰导管和口腔等的上皮细胞永生化

猿猴病毒的SV40大T抗原 (TAg)用于黏附细胞、成纤维细胞、内皮细胞等

EBV 用于淋巴母细胞样细胞

端粒酶TERT 用于间充质干细胞和其他一些细胞


永生化成功的标志


1.细胞类型未发生转化(通过观察分析)

2.细胞可以持续稳定地分裂(与原代细胞进行同步传代验证分析)


目前,较为常用是SV40大T抗原(TAg)和人端粒酶催化亚基(TERT)。此外,还有抑癌基因如p53, pRb等表达受到抑制,使得细胞老化途径受阻。


吉满生物依托高效的慢病毒研发平台,可以提供多种永生化基因的慢病毒产品。点击了解产品



产品清单



引文展示


案例一:建立Hertwig上皮根鞘原代细胞(HERS)永生化细胞系


吉满助力


使用pGMLV-SV40T-PURO(Genomeditech Co., Ltd.)转染原代分离的1代HERS细胞,采用有限稀释方法筛选并鉴定得到可培养超过50代以上的单克隆细胞HERS-H1和HERS-C2。通过CCK-8法、免疫荧光染色和real-time PCR检测了HERS-H1和HERS-C2细胞的增殖、上皮-间充质转化能力和上皮-间充质相互作用等特征。HERS-C2细胞具有EMT特征,在体外可分化为牙骨质形成细胞,在体内可生成牙骨质样组织。HERS-H1能诱导DPCs在体外向成牙本质细胞分化,在体内生成牙本质样组织。


来源于Stem Cell Res.Ther.(IF:7.5;Q1).2019 Jan 3;10(1):3.DOI:10.1186/s13287-018-1106-8


案例二:建立肺泡巨噬细胞(AMs)永生化细胞系


吉满助力


作者从RGS1fl/fl;Flt3-creERt2 YFP 和 RGS1 fl/fl ;Tie2-creERt2 YFP小鼠分离获得的Flt3+ AMs和Tie2+ AMs细胞(图B) 经pGMLV-SV40T lentivirus(Genomeditech Co., Ltd.) 慢病毒感染获得稳定传代的AMs永生化细胞系,加tamoxifen诱导后,流式检测RGS1和YFP的表达变化(图C)。


来源于Cell Death Differ(IF:12.4;Q1).2021 Jul;28(7):2238-2256.DOI:10.1038/s41418-021-00750-x.

最新资讯
靶点一览
2026-10-23
TNF-α:一个经典靶点的长青密码
靶点一览
2026-10-19
IL-6 赛道新叙事
靶点一览
2026-09-24
CNR1(CB1):曾因"自杀风险"沉寂,如今重回减重赛道
利莫那班退市之后,CB1沉寂了近二十年。如今,这个靶点上有了新进展。

2008年,赛诺菲的利莫那班(rimonabant,商品名Acomplia)因抑郁、自杀相关风险等神经精神安全性问题在欧洲暂停销售,2009年正式撤销上市许可,FDA也始终未批准其上市[1,2,3]。此后,CB1减重药物的开发长期停摆。

近年来,incretin类药物已经大幅提高了肥胖治疗的效果,但仍有患者疗效不足、无法耐受,或者停药后体重反弹,非incretin靶点因此还有开发价值[4]。而外周CB1调控的减重活性日前在人体研究中得到验证,让这个沉寂已久的靶点再次进入产业界视野。

2026年9月14日,Corbus Pharmaceuticals公布口服外周限制性CB1反向激动剂CRB-913的CANYON-1研究(1b期)阳性顶线数据。20 mg、40 mg和60 mg三个剂量组都观察到具有统计学显著性的减重效果,截至第12周未见明显平台期;60 mg组第12周LS均数体重下降5.0%,完成研究的受试者中44.4%减重至少5%,最高个体减重达到13.4%[5]。

安全性上,188名接受CRB-913治疗的受试者中,没有报告严重或重度精神类不良事件,也没有报告自杀倾向,精神类不良事件以轻至中度为主[5]。外周限制能否既保住减重活性、又降低中枢风险,是CB1重启开发需要回答的核心问题之一,而这批数据给出了积极的早期临床信号。
当前位置:新闻资讯 > 干货分享 > 技术分享
分
类
细胞永生化工具 | 永生化慢病毒的应用原理及方法
吉满生物
2024-10-09

什么是永生化?


永生化是一种细胞生物学术语。是指动物细胞脱分化失败,受到病毒感染,外源恶意代码转染,辐射或药剂作用后,细胞分裂次数限制机制和DNA检查-自毁机制失灵,导致细胞具有无限分裂生长的能力的过程成为细胞永生化。


(永生化原理图)


永生化细胞的价值


1.永生化细胞稳定均一、性状一致,是体外研究细胞增殖、分化、凋亡、衰老等的理想模型

2.可使传代困难、增殖慢、易衰老的细胞获得永生,并且永生化细胞比原代细胞更易于培养,因为它们生长更强劲,可以获得更多的细胞资源,也节省了分离细胞的周期,降低反复分离原代细胞的成本

3.永生化细胞和肿瘤细胞关系密切,是研究肿瘤发生机制的重要模型

4.永生化细胞可建立稳定细胞库,遗传上相同的种群,有助于提供一致且可重复的实验结果


不同细胞永生化的方法也不同


HPV 可介导人的包皮细胞、角化上皮以及乳腺、胰导管和口腔等的上皮细胞永生化

猿猴病毒的SV40大T抗原 (TAg)用于黏附细胞、成纤维细胞、内皮细胞等

EBV 用于淋巴母细胞样细胞

端粒酶TERT 用于间充质干细胞和其他一些细胞


永生化成功的标志


1.细胞类型未发生转化(通过观察分析)

2.细胞可以持续稳定地分裂(与原代细胞进行同步传代验证分析)


目前,较为常用是SV40大T抗原(TAg)和人端粒酶催化亚基(TERT)。此外,还有抑癌基因如p53, pRb等表达受到抑制,使得细胞老化途径受阻。


吉满生物依托高效的慢病毒研发平台,可以提供多种永生化基因的慢病毒产品。点击了解产品



产品清单



引文展示


案例一:建立Hertwig上皮根鞘原代细胞(HERS)永生化细胞系


吉满助力


使用pGMLV-SV40T-PURO(Genomeditech Co., Ltd.)转染原代分离的1代HERS细胞,采用有限稀释方法筛选并鉴定得到可培养超过50代以上的单克隆细胞HERS-H1和HERS-C2。通过CCK-8法、免疫荧光染色和real-time PCR检测了HERS-H1和HERS-C2细胞的增殖、上皮-间充质转化能力和上皮-间充质相互作用等特征。HERS-C2细胞具有EMT特征,在体外可分化为牙骨质形成细胞,在体内可生成牙骨质样组织。HERS-H1能诱导DPCs在体外向成牙本质细胞分化,在体内生成牙本质样组织。


来源于Stem Cell Res.Ther.(IF:7.5;Q1).2019 Jan 3;10(1):3.DOI:10.1186/s13287-018-1106-8


案例二:建立肺泡巨噬细胞(AMs)永生化细胞系


吉满助力


作者从RGS1fl/fl;Flt3-creERt2 YFP 和 RGS1 fl/fl ;Tie2-creERt2 YFP小鼠分离获得的Flt3+ AMs和Tie2+ AMs细胞(图B) 经pGMLV-SV40T lentivirus(Genomeditech Co., Ltd.) 慢病毒感染获得稳定传代的AMs永生化细胞系,加tamoxifen诱导后,流式检测RGS1和YFP的表达变化(图C)。


来源于Cell Death Differ(IF:12.4;Q1).2021 Jul;28(7):2238-2256.DOI:10.1038/s41418-021-00750-x.

Tel: 400-627-9288
留言咨询
重置
提交
客服
微信
电话
留言
留言咨询
重置
提交