创新发现,从这里开始
当前位置:新闻资讯 > 干货分享 > 技术分享
自噬研究工具 | LC3自噬慢病毒实验原理及应用
吉满生物
2024-10-09

什么是细胞自噬?


简单的说就是“吃掉自己”。是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。


该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。自噬包括生理条件下的基础型自噬和应激条件下的诱导型自噬。研究表明,自噬能在细胞稳态、衰老、免疫、肿瘤发生及神经退行性疾病等多种生理病理过程中发挥重要作用。


(自噬原理图)


LC3(自噬标志物)是微管相关蛋白轻链3(MAP1LC3)的简称,它贯穿整个自噬过程,哺乳动物的LC3可分为三种:LC3A、LC3B和LC3C。


自噬发生时,LC3 蛋白合成后立即在其羧基端被 Atg4 所剪切,产生细胞浆定位的 LC3-I。在自噬过程中,LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3 在内的泛素样体系所修饰和加工,产生分子量为 14kD 的 LC3-II,并定位到自噬小体中。


LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。


得益于荧光蛋白技术的发展,我们可以通过荧光蛋白标记的方式,直观的看到自噬现象和过程。


自噬病毒工具,便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。


自噬单荧光标记慢病毒


吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品,当细胞内没有自噬发生时,荧光-LC3融合蛋白会均匀地分散在细胞质中,一旦细胞发生自噬活动,荧光-LC3融合蛋白就会聚集并转位到自噬体膜,此时在荧光显微镜下可清晰地观察到明亮的荧光斑点,斑点数量的多少就代表了自噬活动的强弱。


自噬双荧光标记慢病毒


吉满自主研发的双荧光自噬慢病毒,可用于标记及追踪LC3以及自噬流的变化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是稳定的荧光表达基团,不受外界影响。由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。由于自噬溶酶体内的酸性环境,导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱表明溶酶体与自噬小体融合形成了自噬溶酶体。而mRFP是一直稳定表达的,因而可以通过GFP与mRFP的亮点比例来评价自噬流进程。点击了解产品


产品清单



最新资讯
靶点一览
2026-10-23
TNF-α:一个经典靶点的长青密码
靶点一览
2026-10-19
IL-6 赛道新叙事
靶点一览
2026-09-24
CNR1(CB1):曾因"自杀风险"沉寂,如今重回减重赛道
利莫那班退市之后,CB1沉寂了近二十年。如今,这个靶点上有了新进展。

2008年,赛诺菲的利莫那班(rimonabant,商品名Acomplia)因抑郁、自杀相关风险等神经精神安全性问题在欧洲暂停销售,2009年正式撤销上市许可,FDA也始终未批准其上市[1,2,3]。此后,CB1减重药物的开发长期停摆。

近年来,incretin类药物已经大幅提高了肥胖治疗的效果,但仍有患者疗效不足、无法耐受,或者停药后体重反弹,非incretin靶点因此还有开发价值[4]。而外周CB1调控的减重活性日前在人体研究中得到验证,让这个沉寂已久的靶点再次进入产业界视野。

2026年9月14日,Corbus Pharmaceuticals公布口服外周限制性CB1反向激动剂CRB-913的CANYON-1研究(1b期)阳性顶线数据。20 mg、40 mg和60 mg三个剂量组都观察到具有统计学显著性的减重效果,截至第12周未见明显平台期;60 mg组第12周LS均数体重下降5.0%,完成研究的受试者中44.4%减重至少5%,最高个体减重达到13.4%[5]。

安全性上,188名接受CRB-913治疗的受试者中,没有报告严重或重度精神类不良事件,也没有报告自杀倾向,精神类不良事件以轻至中度为主[5]。外周限制能否既保住减重活性、又降低中枢风险,是CB1重启开发需要回答的核心问题之一,而这批数据给出了积极的早期临床信号。
当前位置:新闻资讯 > 干货分享 > 技术分享
分
类
自噬研究工具 | LC3自噬慢病毒实验原理及应用
吉满生物
2024-10-09

什么是细胞自噬?


简单的说就是“吃掉自己”。是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。


该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。自噬包括生理条件下的基础型自噬和应激条件下的诱导型自噬。研究表明,自噬能在细胞稳态、衰老、免疫、肿瘤发生及神经退行性疾病等多种生理病理过程中发挥重要作用。


(自噬原理图)


LC3(自噬标志物)是微管相关蛋白轻链3(MAP1LC3)的简称,它贯穿整个自噬过程,哺乳动物的LC3可分为三种:LC3A、LC3B和LC3C。


自噬发生时,LC3 蛋白合成后立即在其羧基端被 Atg4 所剪切,产生细胞浆定位的 LC3-I。在自噬过程中,LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3 在内的泛素样体系所修饰和加工,产生分子量为 14kD 的 LC3-II,并定位到自噬小体中。


LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。


得益于荧光蛋白技术的发展,我们可以通过荧光蛋白标记的方式,直观的看到自噬现象和过程。


自噬病毒工具,便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。


自噬单荧光标记慢病毒


吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品,当细胞内没有自噬发生时,荧光-LC3融合蛋白会均匀地分散在细胞质中,一旦细胞发生自噬活动,荧光-LC3融合蛋白就会聚集并转位到自噬体膜,此时在荧光显微镜下可清晰地观察到明亮的荧光斑点,斑点数量的多少就代表了自噬活动的强弱。


自噬双荧光标记慢病毒


吉满自主研发的双荧光自噬慢病毒,可用于标记及追踪LC3以及自噬流的变化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是稳定的荧光表达基团,不受外界影响。由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。由于自噬溶酶体内的酸性环境,导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱表明溶酶体与自噬小体融合形成了自噬溶酶体。而mRFP是一直稳定表达的,因而可以通过GFP与mRFP的亮点比例来评价自噬流进程。点击了解产品


产品清单



Tel: 400-627-9288
留言咨询
重置
提交
客服
微信
电话
留言
留言咨询
重置
提交