背景
HEK293细胞(人胚胎肾细胞293)是通过原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad5)DNA获得的永生化细胞系,可表达腺病毒5基因。
1973年首次通过腺病毒转化人胚肾细胞获得初始株,1977年McMaster大学Frank Graham博士在第293次实验中,将5型腺病毒DNA片段稳定整合至人胚肾细胞19号染色体,成功建立HEK293细胞系。
该细胞先后由McMaster大学细胞保藏中心、美国典型培养物保藏中心(ATCC)及欧洲细胞保藏中心(ECACC,1985年)保藏,确保全球研究使用的溯源一致性。
一、形态特征
呈上皮细胞形态,贴壁生长特性显著,细胞外观呈颗粒状;因腺病毒基因表达具备高效重组蛋白生产能力,其独特的亚三倍体核型在人类细胞系中较为罕见。
二、核心特性
凭借易于培养、转染效率高等优势,HEK293细胞已成为生物医学研究的核心工具,所有商业化HEK293细胞均追溯至1977年Graham博士建立的原始细胞株。
基于原始细胞系已开发出多种特色衍生株,包括HEK293T、HEK293E、HEK293-6E、HEK293F、HEK293FT、HEK293S、HEK293H等,其中HEK293T、HEK293H、HEK293F、HEK293S为目前应用最广泛的四个衍生系。
1、293T
通过转入SV40 T-antigen基因构建的高转染衍生株,含SV40 ori的质粒可高效扩增,显著提升蛋白表达水平,广泛用于逆转录病毒生产、基因表达研究。其亚系293T/17(G418抗性)及293T/17 SF(EBV基因修饰)分别适用于高转染实验和瞬时转染蛋白表达。
2、293H
经驯化获得的无血清培养适应株,兼具高转染效率与蛋白表达能力,贴壁性良好,适用于噬菌斑检测和重组蛋白生产。衍生株293E(EBNA-1表达)及293-6E(截短EBNA-1表达)进一步优化了悬浮培养条件下的蛋白/病毒载体生产效率。
3、293F
野生型HEK293的无血清悬浮培养适应株,可快速生长并高效表达重组蛋白。亚系293FT(SV40大T抗原稳定表达)专为高滴度慢病毒载体生产设计,293FTM则通过整合ecotropic receptor及MAPPIT报告系统,成为蛋白互作筛选的专用模型。
4、293S
低钙悬浮培养适应株,衍生株293SG(蓖麻毒素抗性)支持四环素诱导的蛋白表达及同源N-糖基化研究,293SGGD(STendoT基因修饰)则为糖基化工程研究提供了特异性工具。
HEK293及其衍生细胞谱系图
HEK293细胞株全球权利体系
前文已详细介绍HEK293细胞的谱系溯源信息。商业化HEK293细胞均源自1977年Frank Graham博士转化的原始细胞株,HEK293T细胞系则由斯坦福大学Michele Carlos教授在HEK293细胞基础上开发而来。
Frank Graham博士持有HEK293细胞的全球权益,斯坦福大学则拥有HEK293T细胞的全球权益。因此,企业若需获得HEK293细胞的商业化使用授权,需获得Frank Graham博士或其授权代理公司的许可并签署授权协议。
此外,因HEK293T细胞衍生自HEK293细胞,企业若需获得HEK293T细胞的商业化使用授权,除需获得斯坦福大学的HEK293T细胞授权外,还须同时取得Frank Graham博士的HEK293细胞授权。
HEK293/293T全球权益示意图
风险提示
生物技术领域的知识产权问题尤为突出,特别是细胞系的商业化使用与授权环节。企业如果未获得HEK293商业化使用授权,将会面临一定的法律风险。
与此同时,监管机构对生物制品的合规性提出明确要求。早期国家食品药品监督管理局规定,生物制品需提供起始原材料的来源、质量标准、保存条件、生物学特征、遗传稳定性及免疫学研究等完整资料。
HEK293细胞株授权解决方案
吉满生物秉持“客户第一”服务理念,打造完善的知识产权(IP)授权服务体系,确保项目合规并有效控制风险。
吉满生物拥有HEK293细胞商业化使用授权,可改造、开发和销售相关细胞株并提供清晰溯源文件;同时获得该细胞中国内地定向用途授权独家代理,为客户提供合规解决方案,解决授权沟通繁琐及费用高昂问题,实现临床前至IND/BLA阶段合规无缝衔接,保障客户合法开展中下游产品放行实验,助力生物药企业规避法律风险并加速市场化。
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持续强化技术深耕,拓展合作边界
未来,吉满生物将继续强化在细胞模型、蛋白/抗体表达等领域的技术深耕,持续拓展合作边界,积极参与国际标准和产业规范的建立。
吉满生物依托一流的研发团队和完善的质量管理体系,为客户提供专业、高效、个性化的整体解决方案,助力科研创新和项目成功。公司将持续以高品质的产品与服务,推动全球生物医药事业的高质量发展,为人类健康福祉贡献更大力量。
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