实验干货
报告基因是一类在特定条件下表达并产生易检测性状的基因。它们的编码产物包括蛋白质或酶,具有无毒、无免疫原性、易于检测及高特异性等特点。
细胞水平的分析评价是体外进行药物有效性评估的重要指标之一,被广泛地应用在新药研发过程中。
但由于所选用细胞的局限性,很多传统的细胞水平活性分析方法有着灵敏度低,重复性差,操作复杂,检测周期长等缺点。
通过报告基因系统构建的报告基因细胞株(Reporter cell line)被认为可以克服传统细胞水平分析方法缺点,被逐步广泛运用到新药研发的进程中。
报告基因细胞系
报告基因细胞株(Reporter celline)以药物作用机制(MOA)为基础,在细胞内建立起靶点转导信号与报告基因表达的相关性,通过检测报告基因的表达情况以监控靶点信号通路转导,进而构建一种药物靶点特异性的模型细胞株。
优势:这类细胞株批间差小,且转入细胞内的检测信号强,以此为基础开发的分析方法灵敏度高,检测周期短,重复性好,并且操作简单。
主要应用
1.基因表达调控研究
将报告基因与待研究启动子连接,可以研究顺式作用元件和反式作用因子对基因表达的调控作用。
2.药物筛选与药效评价
可用于高通量药物筛选,通过观察药物对报告基因表达的影响,快速筛选出有潜在治疗作用的候选药物。
3.活体动物成像
用荧光素酶基因标记肿瘤细胞,可在活体动物中实时观测肿瘤的生长、转移以及药物治疗效果。
4.蛋白相互作用研究
利用双杂交系统或荧光共振能量转移(FRET)技术,报告基因系统可以用于研究蛋白质之间的相互作用。
5.细胞示踪研究
标记干细胞或免疫细胞,研究其在体内的增殖、分化和迁移过程。
吉满服务
吉满生物具备特有的荧光素酶报告基因系统,基于药物作用机制(MOA),可以为客户构建多种萤火虫荧光素酶 (Firefly luciferase)报告基因细胞系产品,包括细胞因子、免疫检查点、ADCC/ADCP、GPCR等多种功能细胞系。
适用于信号传导功能研究、免疫检查点检测、早期药物发现与筛选及CMC质控放行,助力基础研究与新药研发。
靶点覆盖广泛
目前吉满生物已布局近400个热门靶向药靶点,拥有超过500株报告基因细胞系现货产品,能实现高灵敏度和高特异性的信号检测,可满足小分子、单抗、双抗等药物在早筛、Binding、体外药效评价、质量控制和动物免疫等方面的研究需求。针对特定研究目标,还可定制化设计靶点相关的报告基因细胞系,为科研工作者提供更灵活的选择和更精准的支持。
一、ADC药物靶点
ADC抗体
ADC Positive Referen
ADC偶联免疫
TLR2/TLR7/TLR8/TLR9/STING
CEACAM
HAVCR2(TIM3):CEACAM1/CEACAM5
CEACAU8/CEACAM6/CEACAM7等
ADC乳腺癌靶点
HER3(ERBB3)/NECTIN4/SLC39A6(LIVI)
HER2(ERBB2)等
ADC肺癌靶点
HER3(ERBB3)/CMET:HGF/CD276(B7H3)/
TROP2(TACSTD2)/DLL3/SE26/ITGB6等
ADC宫颈癌靶点
F3(CD142;TF)/FOLR1(FRα)等
ADC胃癌靶点
CLDN18/HER3(ERBB3)/TROP2(TACSTD2)
GUCY2C(GC-C)/FGFR2/CD44等
ADC卵巢癌靶点
SLC34A2(NaPi2b)/FOLR1(FRa)/CDH6/
ALPPL2 ALPF等
ADC前列腺靶点
FOLHI (PSMA) /AR/KLK2/ACP3等
二、免疫细胞调节与免疫疗法靶点
髓系-募集/维持轴
CXCR2:IL-8/CXCR1:IL-8/CXCR4/CSF1R
CCR5/CCR2/C5aR/CX3CR1
髓系-激活/共刺激与PRR
TLR3/TLR7/TLR9/CD40:CD40L/TLR8/
TREM1/STING/CLEC5a/CLEC7A(Dectin-1)
CLEC4E(Mincle)/CD89(FcαRI)
髓系-代谢/腺苷/色氨酸
ADORA2A/CD73(NT5E)/PTGER4/
ENTPD1(CD39)/ID01/ID02/ARG1
SIGLEC
CD24-Siglec10/SIGLEC15/SIGLEC9
SIGLEC8/SIGLEC3(CD33)/SIGLEC7
SIGJEC12/SIGLEC11/SIGLEC5
SIGLEC16/SIGLEC1
FcγR 受体
FcγR/ADCCP/NK92
D3-CD73-腺苷
ADORA2A/CD73(NT5E)/ENTPD1(CD39)
IL15 IL2
IL15/IL2
NK细胞相关
MICA;MICB/NKG2D/NKp46/NKP30:B7-H6NKP44/NKG2A:HLA-E/NKG2H
B细胞相关
CD28/CD3/BCMA : BAFFR: TACICD20(MS4A1)/CD19
T细胞相关
CD28/CD3/4-1BB
LILRB
LILRB2(ILT4)/LILRB1(ILT2)/LILRB4(ILT3)LILRB5/LILRB3(ILT5)
LILRB1与HLAG1
LILRB1(ILT2)/HLA-G
三、代谢与自身免疫性疾病靶点
高胆固醇
PCSK9/THRB/ANGPTL3/ANGPTL4
ASGR1/LDLR
非酒精性脂肪肝(NASH)
GLP1R/FGFR1/THRB
荨麻疹
c-Kit:SCF/TRKA/MRGPRX2/IGHE(FcεRIa)
肠炎
IL-23/TNF:TNFR2:TNFR1
α4β7(LPAM-1):MAdCAM
TL1A:DR3(TNFRSF25)
红斑狼疮
CD40:CD40L/INF-α
BCMA:BAFFR:TACI/BDCA2(CLEC4C)
IL6 OSMR
IL6/OSMR
四、信号通路相关靶点
CDH
CDH1/CDH3/CDH6/CDH17
DLL
DLL1/DLL4/DLL3
STEAP
STEAP1/STEAP2/STEAP3/STEAP4
CLDN系列
CLDN18/CLDN3/CLDN4/CLDN6
CLDN9/CLDN1/CLDN18.2
五、神经系统/神经退行性疾病靶点
NK1R NK2R NK3R神经
TACR1(NK1R)/TACR2(NK2R)
TACR3(NK3R)
阿尔兹海默病
TREM2
多种细胞模型选择
在构建报告基因细胞系时,不同的细胞系因其独特的生物学背景和工程化特性,在具体的研究方向上各有优势。吉满生物提供多样化细胞模型选择,更好满足不同研究需求。此外,针对特定靶点优化了部分细胞系,使其在表达水平和功能上更加贴合实际应用场景。
01、HEK293细胞
源自人胚胎肾细胞,具有贴壁生长特性,因被整合了腺病毒E1A/E1B基因而获得永生化,最突出的特点是极高的转染效率和强大的外源基因表达能力。
应用:适合基础信号转导研究或药物筛选
02、CHO-K1细胞
中国仓鼠卵巢细胞,支持悬浮培养和大规模生产。
应用:适用于抗体药物功能评价
03、Jurkat细胞
人T淋巴细胞白血病细胞系,悬浮生长,是研究T细胞信号传导和免疫应答的重要模型。
应用:适用于免疫学研究和免疫相关药物筛选
除了上述“明星细胞模型”外,吉满生物的细胞模型库还涵盖了THP1、TF-1、A549、MDCK、B16-F10、MC38等更多特异化的细胞模型,满足客户在肿瘤、免疫、神经等多个研究方向的个性化需求,加速药物研发进程。
值得注意的是,吉满生物已正式获得HEK293、CHO-K1、Jurkat E6.1细胞全球商业化使用授权,以及HEK293细胞中国内地定向用途独家分授权代理,极大保障客户使用这些细胞系的合法性与安全性。
荧光信号灵敏稳定
吉满生物提供的Luciferase稳转细胞株采用先进慢病毒平台构建,并通过抗生素筛选和有限稀释法进行单克隆化,在定期验证报告基因响应性的基础上确保了细胞背景均一和遗传稳定性。萤火虫萤光素酶编码经过改进优化,保障了高灵敏度荧光信号输出。
数据展示
在受到浓度梯度的相应刺激后的功能性检测结果
“S”型激活曲线平滑规则,在低浓度刺激下荧光信号维持在较低的本底水平,而激活后的最大信号值与基线本底信号之间存在极高的信噪比,检测窗口大且EC50值极低。
在检测各类信号通路抑制剂效价方面的灵敏度和广泛应用性
该细胞系非常适合用于相应信号通路的抗体药物或抑制剂的体外药效评估及高通量筛选
以上是吉满生物构建的不同报告基因细胞系在长期传代过程中的性能表现。
结果表明,各细胞系均在相应代次范围内表现出优异的稳定性,这种稳定性不仅体现在荧光强度的持续可靠,也表现在不同刺激条件下的高度敏感性和准确响应。
这些细胞系在长期培养过程中未出现明显的信号衰减或背景噪音增加的情况,能够满足药物筛选与信号通路研究中的长期研究。
一站式专业技术服务平台
吉满生物拥有专业的技术支持团队,可协助客户解决在细胞系使用过程中遇到的各种问题,提供从细胞培养到实验设计的全方位指导。
吉满生物深刻理解科研服务的复杂性,致力于构建一个全面、高效、可靠的解决方案生态系统。通过整合上下游资源,我们为客户打造了覆盖“工具-检测-服务”的完整产品矩阵,提供一站式的科研体验。
