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文献解读

西安交通大学第一附属医院吴岳教授团队在《Blood》在线发表题为“Targeting FXR in Hepatocytes: A Promising Approach to Enhance Fibrinolysis and Reduce Deep Vein Thrombosis Risk”的文章。

该研究提出，营养感应核受体FXR可负向调控肝细胞PAI-1表达，FXR失活可能导致纤溶受损并促进血栓形成，为肥胖相关DVT防治提供新的分子靶点。

研究背景

肥胖是一项全球性的重大健康挑战，也是静脉血栓栓塞性疾病（VTE）的危险因素。纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1，由基因SERPINE1编码）是纤溶的负调控因子，长期被认为与深静脉血栓（DVT）密切相关。

过去认为脂肪细胞是PAI-1主要来源，但研究表明约70%的血浆PAI-1由肝细胞产生，肝脏在肥胖相关纤溶障碍中起核心作用。然而，肥胖导致PAI-1表达变化的分子机制仍未被明确。

项目研究

高脂饮食（HFD）小鼠表现出纤溶时间缩短和深静脉血栓（DVT）负担加重的特征

为评估高脂饮食（HFD）对血栓相关表型的影响，作者对连续喂养高脂饮食或正常饮食（ND）16周的雄性C57BL/6J小鼠进行了血液学及代谢指标检测。

与ND小鼠相比，HFD小鼠体重及血浆甘油三酯、胆固醇显著升高；同时血栓负荷增加。重要的是，HFD小鼠血浆纤维蛋白降解产物（FDP）升高，表明体内纤维蛋白形成与溶解过程被激活。

功能检测显示，HFD小鼠血浆纤维蛋白形成动力学基本正常，但凝块溶解时间显著延长，表明纤溶能力下降。这些结果提示高脂饮食导致DVT负担增加，部分原因是纤溶反应能力下降。

Fig.1 高脂饮食（HFD）可延缓小鼠的纤溶过程并

加重深静脉血栓（DVT）负担

肝脏PAI-1过度表达介导了肥胖所致的纤溶功能障碍

为探究肥胖状态下纤溶活性降低的分子机制，研究首先检测了已知会影响纤溶系统的循环成分。结果显示，肥胖人群与高脂饮食小鼠的血浆 PAI-1显著升高并与体质指数（BMI）正相关；

进一步研究发现血浆PAI-1的主要来源为肝脏，并过向HFD小鼠注射了肝脏特异性AAV8-TBG-shSerpine1，并诱导下腔静脉狭窄。该干预显著降低了血浆PAI-1水平，同时减小了血栓的长度和重量。因此，肥胖导致肝脏PAI-1表达上调，从而引起血浆纤溶功能受损。

Fig.2 肥胖可提高小鼠肝脏及循环系统中的PAI-1水平

转录组学和靶向胆汁酸代谢组学分析表明，肥胖导致FXR信号通路异常

转录组学与靶向胆汁酸代谢组学分析表明，肥胖会导致肝脏FXR信号通路受损，从而促进PAI-1（Serpine1）过度表达。

单细胞RNA测序数据显示，Serpine1主要在肝细胞中高表达；差异基因富集分析揭示，肥胖者肝脏中胆汁酸分泌通路显著富集，其相关基因多为FXR的直接或间接靶基因。在肥胖人群、长期高脂饮食（HFD）狒狒及小鼠肝脏中，FXR（NR1H4）及其靶基因ABCB11和NR0B2表达普遍下降，与SERPINE1呈显著负相关，提示FXR信号受抑是PAI-1上调的重要原因。

体外实验进一步证实，棕榈酸处理小鼠原代肝细胞后，Serpine1转录与PAI-1分泌明显增加，而FXR及其靶基因Nr0b2、Abcb11显著下调，呈负相关关系。综合结果表明，肥胖通过抑制肝细胞FXR信号通路，诱导PAI-1过度表达和分泌，从而削弱纤溶功能并促进血栓形成。

Fig.3 肥胖状态下PAI-1上游调控因子的预测

FXR缺失小鼠表现出纤溶功能受损和加重的深静脉血栓（DVT）负担

双荧光素酶及ChIP实验显示，FXR通过结合PAI-1启动子−761至−752 bp区域抑制其转录。也就是说，FXR直接负向调控PAI-1基因表达，从而降低肝细胞及循环系统中PAI-1水平。

为直接评估FXR缺失对血浆纤溶功能及DVT的影响，研究构建了FXR基因敲除（Fxr-null）小鼠，其肝脏及血浆中PAI-1 mRNA和蛋白水平均显著升高，并表现出出血时间缩短、血栓长度和重量增加、凝块溶解时间延长等特征，而纤维蛋白形成无变化，提示纤溶功能受损而非凝血增强。

为验证PAI-1的作用，研究利用肝靶向AAV-TBG-shSerpine1沉默Serpine1，结果血浆PAI-1下降，血栓负担显著减轻，内源性纤溶潜能（EPP）及峰值恢复至正常水平，证明PAI-1在FXR缺失致纤溶障碍中起关键作用。总之，FXR缺失导致PAI-1过度表达、纤溶受损，从而加重血栓形成，揭示FXR–PAI-1通路在血栓调控中的核心作用。

Fig.4 FXR在调控PAI-1表达中的作用及其对血浆纤溶功能和深静脉血栓（DVT）的影响

FXR激动剂tropifexor可显著改善高脂饮食（HFD）诱导的小鼠纤溶活性下降和深静脉血栓（DVT）负担加重的病理状态

在体外实验中，为模拟肥胖引起的低纤溶活性，小鼠原代肝细胞（MPHs）经棕榈酸处理后，再分别与FXR激动剂GW4064、CDCA或tropifexor共同孵育。

结果显示，这些FXR激动剂均能显著降低细胞内及培养上清中的PAI-1蛋白和mRNA水平。在体内实验中，经tropifexor处理的HFD小鼠肝脏中FXR表达略有上调，肝脏Serpine1和血浆PAI-1表达显著下降。

功能性检测显示，tropifexor处理组HFD小鼠出血时间延长，纤维蛋白形成与溶解过程加快，血栓重量与长度均明显减小，提示药物有效改善了肥胖相关的纤溶障碍与血栓负担。

Fig.5 FXR激动剂可改善肥胖导致的纤溶功能受损并减轻深静脉血栓（DVT）负担

研究结论

本研究发现，靶向激活肝细胞FXR信号可显著抑制PAI-1表达，从而增强肥胖小鼠的纤溶活性并减轻DVT负担。通过强制性调控FXR不仅有效降低血浆PAI-1水平，还能改善纤溶相关代谢特征，最终减少血栓形成，说明FXR对PAI-1的调节在纤溶和DVT的发生发展中具有关键作用。为以“肝细胞FXR—PAI‑1轴”为靶点的抗血栓治疗提供了理论依据。