文献解析
2025年11月，复旦大学附属中山医院胸外科詹成、蒋伟教授团队，在国际顶级期刊《Cancer Communications》上发表了封面论文 “CD24 is a Promising Immunotherapeutic Target for Enhancing Efficacy of Third-Generation EGFR-TKI on EGFR-mutated Lung Cancer”。
梁嘉琪、毕国澍、黄小龙博士为第一作者。
该研究发现靶向CD24可以显著增敏第三代EGFR-TKI疗效，不仅揭示了CD24作为肿瘤免疫治疗靶点的重要价值，也为克服EGFR-TKI治疗耐药这一难题提供了新思路。
研究背景：EGFR-TKI耐药困境
肺癌是全球最常见且死亡人数居于首位的癌症，其中非小细胞肺癌（NSCLC）在新诊断病例里占比约85%。
非小细胞肺癌的常见致病因素EGFR突变，会持续激活下游信号通路，促使肿瘤细胞不断增殖。而第三代EGFR-TKI作为当前全球EGFR突变型肺癌一线疗法，虽初期疗效显著，但无法完全消除肿瘤，残留肿瘤细胞在约20个月后就会引发肿瘤进展，凸显出需额外策略提升其疗效的紧迫性。
免疫治疗与第三代EGFR-TKI联合本应是潜在良方，可增强免疫反应减少残留肿瘤，但免疫检查点抑制剂与EGFR-TKI联合效果不佳，无法提升患者预后并且会导致不良反应显著增加。
项目研究
研究对第三代EGFR-TKI中的代表药物——奥希替尼短期处理、耐受持久细胞以及耐药细胞开展转录组测序等，重点分析表达显著升高的膜蛋白或者分泌性蛋白编码基因。结果发现CD24等11个膜蛋白或者分泌性蛋白基因在短期处理、耐受持久细胞以及耐药细胞中表达均显著上升。
研究整合29例肺癌标本单细胞RNA-测序数据，分析这些基因在不同类型的细胞中的表达情况，发现CD24在肿瘤细胞中特异性表达。因此，研究选择CD24作为主要对象，采用qRT-PCR、Western blot、流式等方法，充分验证了多种第三代EGFR-TKI处理均导致CD24显著上升。
同时，研究对患者肺癌组织进行单细胞核测序及多重免疫组化等检测，同样发现CD24表达在接受第三代EGFR-TKI治疗后的残余肿瘤组织中表达显著上调，并与患者预后相关。
研究进一步在PC-9、HCC827和H1975等EGFR突变肺癌细胞系中敲除CD24，并在已经敲除CD24的细胞中重新过表达CD24。
进一步的检测结果表明：CD24显著提升了第三代EGFR-TKI处理下的细胞增殖、细胞对第三代EGFR-TKI的耐药性、以及多个EGFR下游通路活性等。
研究通过分析单细胞核测序的数据，发现第三代EGFR-TKI处理显著促进肿瘤中的M2巨噬细胞浸润，并且通过多重免疫组化证实了这一细胞浸润的提升。
CD24是重要的“别吃我”信号分子。研究通过巨噬细胞共培养实验，发现敲除CD24能够显著提升巨噬细胞吞噬第三代EGFR-TKI处理下的肿瘤细胞或耐药细胞。同时，研究在共培养实验中采用I类创新药物CD24单抗ATG-031，发现采用ATG-031阻断CD24同样可以显著提升巨噬细胞对第三代EGFR-TKI处理下的肿瘤细胞的吞噬作用。
研究分别在裸鼠皮下成瘤模型、小鼠肺原发成瘤模型、患者肿瘤组织来源的移植瘤模型中研究了敲除CD24或采用ATG-031与奥希替尼的增敏作用和机制。研究发现敲除CD24或采用ATG-031处理的PC-9细胞移植瘤对奥希替尼的敏感性显著高于对照细胞。
小鼠肺原发成瘤模型中采用ATG-031联合奥希替尼治疗显著提升治疗效果。患者肿瘤组织来源的移植瘤模型中ATG-031同样对奥希替尼显著协同增敏。同时，在裸鼠皮下成瘤模型及患者肿瘤组织来源的移植瘤模型中清除巨噬细胞显著削弱了增敏效果，表明靶向CD24通过巨噬细胞对奥希替尼协同增敏。
研究为了进一步探索CD24表达上升的机制，采用DNA pull down联合质谱和siRNA敲减等，发现转录因子YY1是CD24表达上升的关键。进一步的检测表明，第三代EGFR-TKI处理导致YY1 S247磷酸化显著增高，从而促进CD24表达。通过YY1 S247A突变来阻断这一位点的磷酸化，可以显著阻断第三代EGFR-TKI处理下的CD24表达上升。
研究通过分析ChIP-Seq数据及既往发表文献等，发现CD24转录起始位点上游存在增强子序列以及多个YY1结合峰，因此，研究考虑YY1 S247磷酸化可能影响CD24的增强子—启动子环。CoIP等实验发现，YY1 S247磷酸化促进YY1二聚体形成，而这一二聚体形成促进YY1介导的增强子—启动子环，从而促进CD24表达。
最后，研究深入探讨了YY1 S247磷酸化的上游激酶。通过对YY1 S247位点的周围序列分析，研究锁定了JNK等多个可能磷酸化YY1 S247位点的激酶，并且通过抑制剂处理的方式，验证了第三代EGFR-TKI通过JNK磷酸化YY1 S247位点，进而促进CD24表达。
总结展望
这项研究全面展示了 ATG-031（一种首创的新型 CD24 抗体）对第三代 EGFR-TKIs 疗效的协同增强作用，以及其强大的临床前抗肿瘤疗效。
未来可推动CD24靶向疗法（尤其是ATG-031）与第三代EGFR-TKI的联合方案进入临床研究阶段，以验证其在EGFR突变肺癌患者中的安全性和有效性。此外，基于CD24在肿瘤发生发展中的关键作用，可进一步探索CD24靶向疗法在其他类型肿瘤治疗中的应用潜力，未来有望成为增强多种靶向药物疗效的通用联合策略。
同时，深入研究CD24作为生物标志物在肿瘤诊断、耐药评估、预后评估等方面的价值，为肿瘤的精准治疗提供新的思路和方向。
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原文引用
“The plasmids were transfected into 293T cells with Renilla luciferase reported plasmids (Genomeditech,Shanghai, China)”
文献原文
https://doi.org/10.1002/cac2.70068
来源：课题组供稿
