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pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
产品简介

       细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。

        检测自噬形成时,使用电镜耗时长,不利于监测(Monitoring)自噬形成,而hLC3在自噬形成过程中会发生聚集的现象,因此吉满生物利用hLC3这种现象,构建了带GFP和RFP标记的用于细胞自噬检测的慢病毒和腺病毒产品。无自噬时,RFP-GFP-hLC3融合蛋白弥散在胞浆中,在荧光显微镜下显示为黄色斑点;自噬形成时,由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。自噬溶酶体由于溶酶体内部的酸性环境,可以导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱可指示自噬溶酶体形成的顺利程度,GFP越少,则从自噬小体到自噬溶酶体阶段流通得越顺畅。反之,自噬小体和溶酶体融合被抑制,自噬溶酶体进程受阻。RFP是一直稳定表达的,因此通过不同颜色斑点的计数可以清晰看出自噬流的强弱。


图谱信息

image.png

产品规格
产品货号产品名称包装规格
GM-0220LV05-1pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus100ul*5管(1E8TU/mL)
GM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)


注意事项

1. 病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。

2. 病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。

3. 操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1h以上后弃去。

4. 用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜出观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。

5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。


保存条件

-80℃保存。(保存时间以12个月以内为宜,如保存时间过长,使用前请重新检测病毒滴度)


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pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus
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       细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。

        检测自噬形成时,使用电镜耗时长,不利于监测(Monitoring)自噬形成,而hLC3在自噬形成过程中会发生聚集的现象,因此吉满生物利用hLC3这种现象,构建了带GFP和RFP标记的用于细胞自噬检测的慢病毒和腺病毒产品。无自噬时,RFP-GFP-hLC3融合蛋白弥散在胞浆中,在荧光显微镜下显示为黄色斑点;自噬形成时,由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。自噬溶酶体由于溶酶体内部的酸性环境,可以导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱可指示自噬溶酶体形成的顺利程度,GFP越少,则从自噬小体到自噬溶酶体阶段流通得越顺畅。反之,自噬小体和溶酶体融合被抑制,自噬溶酶体进程受阻。RFP是一直稳定表达的,因此通过不同颜色斑点的计数可以清晰看出自噬流的强弱。


图谱信息

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产品规格
产品货号产品名称包装规格
GM-0220LV05-1pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3-Puro Lentivirus100ul*5管(1E8TU/mL)
GM-0220LV05-2100ul*10管(1E8TU/mL)


注意事项

1. 病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。

2. 病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。

3. 操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1h以上后弃去。

4. 用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜出观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。

5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。


保存条件

-80℃保存。(保存时间以12个月以内为宜,如保存时间过长,使用前请重新检测病毒滴度)


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